TG1化學感受態細胞

TG1化學感受態細胞

產品規格CAT#: BFNC86015-01(10×100ul)/BFNC86015-02(50×100ul)

TG1：                                                         100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl):                   10μl

保存條件(保質期)：                            -80℃（6個月）

基因型

[F′traD36 proAB lacI^qZΔM15] supE thi-1Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(r_K^–m_K^–)

產品說明

TG1來源于E. coli K-12菌株，是目前生長速度極快的克隆用大腸桿菌菌株，在平板上37℃，7 h可見克隆。主要的噬菌體展示用菌株，同時也可用于普通質粒的構建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍白斑篩選等實驗；但不含核酸酶endA1突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時推薦使用質粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內大量的核酸酶。

青旗生物生產的TG1感受態細胞經特殊工藝制作，pUC19質粒檢測轉化效率>10⁹cfu/μg DNA。

操作方法

1. TG1感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手bo打EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

TG1化學感受態細胞

注意事項

1. 感受態細胞適宜在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。

2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。