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酶聯(lián)免疫吸附實驗

酶聯(lián)免疫吸附實驗

簡要描述:酶聯(lián)免疫吸附實驗
用于做ELISA檢測的樣本應(yīng)首先離心除去沉淀物或懸浮物質(zhì)保證樣本澄清透明。為確保實驗的準(zhǔn)確性和可靠性,保證樣品不被降解,建議-20℃或-80℃保存的樣本在1-6個月內(nèi)完成檢測,4℃保存的樣本在一周內(nèi)完成檢測。

更新時間:2021-07-20

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

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詳情介紹
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅用于科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

一、   酶聯(lián)免疫吸附實驗液體樣本:

1.    血清:PP管(不含熱原和內(nèi)毒素)收集全血,室溫自然凝固20-30分鐘,或4℃過夜,分離出血清,(適當(dāng)傾斜離心管以擴(kuò)大液面的橫截面,使血清能更大程度分離出來)。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分離心20-30分鐘,將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,收集上清,立即進(jìn)行測定。如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血清樣本應(yīng)注意避免溶血和細(xì)菌污染。

2.    血漿:使用抗凝管或加入抗凝劑(EDTA、檸檬酸鈉或肝素)的PP管收集全血,混合10-20分鐘,4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘,收集上清,立即進(jìn)行測定,如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3.    尿液、胸腹水、腦脊液、母乳、唾液:用無菌管收集樣本,4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

4.    細(xì)胞培養(yǎng)上清:

1)        胞外:無菌管收集,4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘,除去細(xì)胞碎片和雜質(zhì),收集上清液備用,樣本保存在-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2)        胞內(nèi):加入裂解液,或用pH7.2-7.4的PBS稀釋細(xì)胞懸液,使細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,通過反復(fù)凍融(如果反復(fù)凍融,破碎效果不好,可采用超聲波破碎),使細(xì)胞膜破壞并釋放出細(xì)胞內(nèi)成分,2000轉(zhuǎn)/分,離心20-30分鐘,收集上清。

二、酶聯(lián)免疫吸附實驗固體樣本:

1.    組織標(biāo)本:標(biāo)本采集后用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩J褂脮r切割標(biāo)本,稱取1g左右組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2.    植物標(biāo)本:取0.1g新鮮植物組織樣本,液氮中充分研磨;加入樣品體積9倍的提取液(pH7.2-7.4左右的PBS),4℃ 8000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘,取上清并暫時保存于4℃待用。如需精確提取,可在液氮研磨后加入1ml的提取液(80%甲醇), -20℃過夜后再4℃ 8000轉(zhuǎn)/分,離心1小時,取上清;上清液過C-18固相萃取柱,過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存?zhèn)溆茫簧蠘忧凹尤雙H7.2-7.4左右的PBS緩沖液(1ml定容)。混勻后室溫放置30分鐘,4℃8000轉(zhuǎn)/分,離心15分鐘,取上清并暫時保存于4℃待用。

3.    土壤:稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,充分混勻。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

 

 



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