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酶聯免疫吸附實驗

酶聯免疫吸附實驗

簡要描述:酶聯免疫吸附實驗
用于做ELISA檢測的樣本應首先離心除去沉淀物或懸浮物質保證樣本澄清透明。為確保實驗的準確性和可靠性,保證樣品不被降解,建議-20℃或-80℃保存的樣本在1-6個月內完成檢測,4℃保存的樣本在一周內完成檢測。

更新時間:2021-07-20

廠商性質:生產廠家

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詳情介紹
品牌其他品牌供貨周期現貨
主要用途僅用于科研應用領域醫療衛生,生物產業

一、   酶聯免疫吸附實驗液體樣本:

1.    血清:PP管(不含熱原和內毒素)收集全血,室溫自然凝固20-30分鐘,或4℃過夜,分離出血清,(適當傾斜離心管以擴大液面的橫截面,使血清能更大程度分離出來)。4℃ 2000轉/分離心20-30分鐘,將血清和紅細胞迅速小心地分離,收集上清,立即進行測定。如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,避免反復凍融,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血清樣本應注意避免溶血和細菌污染。

2.    血漿:使用抗凝管或加入抗凝劑(EDTA、檸檬酸鈉或肝素)的PP管收集全血,混合10-20分鐘,4℃ 2000轉/分,離心20-30分鐘,收集上清,立即進行測定,如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,避免反復凍融。樣本應避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3.    尿液、胸腹水、腦脊液、母乳、唾液:用無菌管收集樣本,4℃ 2000轉/分,離心20-30分鐘。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

4.    細胞培養上清:

1)        胞外:無菌管收集,4℃ 2000轉/分,離心20-30分鐘,除去細胞碎片和雜質,收集上清液備用,樣本保存在-20℃或-80℃,避免反復凍融,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2)        胞內:加入裂解液,或用pH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右,通過反復凍融(如果反復凍融,破碎效果不好,可采用超聲波破碎),使細胞膜破壞并釋放出細胞內成分,2000轉/分,離心20-30分鐘,收集上清。

二、酶聯免疫吸附實驗固體樣本:

1.    組織標本:標本采集后用液氮迅速冷凍保存備用。使用時切割標本,稱取1g左右組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。4℃ 2000轉/分,離心20分鐘,仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2.    植物標本:取0.1g新鮮植物組織樣本,液氮中充分研磨;加入樣品體積9倍的提取液(pH7.2-7.4左右的PBS),4℃ 8000轉/分離心30分鐘,取上清并暫時保存于4℃待用。如需精確提取,可在液氮研磨后加入1ml的提取液(80%甲醇), -20℃過夜后再4℃ 8000轉/分,離心1小時,取上清;上清液過C-18固相萃取柱,過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存備用;上樣前加入pH7.2-7.4左右的PBS緩沖液(1ml定容)。混勻后室溫放置30分鐘,4℃8000轉/分,離心15分鐘,取上清并暫時保存于4℃待用。

3.    土壤:稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,充分混勻。4℃ 2000轉/分,離心20分鐘,仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

 



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